FPMPP對多巴胺D4受體的選擇性作用 WHATMAN GF/C濾紙的應(yīng)用
FPMPP對多巴胺D4受體的選擇性作用
【摘要】:正 目的:多巴胺D4受體的腦區(qū)分布不同于D2、D3受體,與精神分裂癥密切相關(guān);非經(jīng)典安定劑氯氮平對D4受體亞型有較高的親和力,因此D4受體潛在的臨床價(jià)值引起人們的關(guān)注。本工作利用體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究FPMPP對D4受體的選擇性作用。方法:受體結(jié)合實(shí)驗(yàn):異源表達(dá)D1、D2、D3受體的Sf9細(xì)胞,和異源表達(dá)D4受體的CHO細(xì)胞用于放射性受體結(jié)合競爭實(shí)驗(yàn)。D2類受體結(jié)合競爭實(shí)驗(yàn)時(shí),以InM[~3H]spiperone作為放射性配基,以1μM spiperone作為確定非特異結(jié)合的冷藥。終反應(yīng)體積為200μl,30℃孵育1小時(shí),GF/C(Whatman)玻璃纖維濾紙負(fù)壓抽濾終止反應(yīng),Beckman LS6500多功能液體閃爍計(jì)數(shù)儀測定放射性強(qiáng)度。