WHATMAN 4057-200 DE-52纖維素 2KG裝 停產(chǎn)多年，將于18年下半年重新供應(yīng)中國(guó)市場(chǎng)
WHATMAN 4057-200 DE-52纖維素 2KG裝品介紹：
離子交換層析法是所有生物分子純化技術(shù)*為簡(jiǎn)明，普通和方便的方法。
因而，Whatman離子交換填料廣泛地用于從實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)到大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。在生物分子純化領(lǐng)域已有二十多年的歷史了。
填料適用于柱分離和分批分離法應(yīng)用。產(chǎn)品用高質(zhì)量纖維制成。選用“50系列”如DE52，CM52等作分批或柱分離，流速較低(40厘米／41時(shí)),但載量高。
WHATMAN 4057-200 DE-52纖維素 2KG裝 停產(chǎn)多年，將于18年下半年重新供應(yīng)中國(guó)市場(chǎng)
纖維素DE-52為中等堿性陰離子交換劑，柱層析用于吸附劑，用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等各種生物高分子。
纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
該法提取IgG簡(jiǎn)便，既可小量提取，也可大量制備。
1．批量提取法 稱取DEAE-纖維素(DE52)50g，置于1000ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細(xì)顆粒，再經(jīng)酸堿處理后，用0.01～0.05mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。將水分抽干，或用布氏濾斗(內(nèi)放兩層濾紙)過(guò)濾，收集濕纖維素，以降低其離子強(qiáng)度。按1ml血清加濕重5g DE52，經(jīng)過(guò)充分?jǐn)嚢?，?℃吸附1h。上清液可再如此處理一次，即獲得較純的IgG。該法提取IgG簡(jiǎn)便，既可小量提取，也可大量制備。
2．Tris-Cl離子交換層析法(Ion-exchange chromatography)
【材料和試劑】
（1）DE52纖維素。
（2）HCl；NaOH；0.01～0.05mol/L，pH8.0 PB；0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl；0.5mol/L NaCl。
（3）待純化標(biāo)本：雜交瘤腹水或培養(yǎng)上清，**血清或飽和硫酸銨粗提品。
（4）1.5×50cm 層析柱；透析袋；紫外分光光度計(jì)及其他透析和層析所需的試劑和器材。
【操作步驟】 Cellulose DE-52 DEAE 纖維素 DE-52
（1）DE52纖維素的處理：DE52經(jīng)酸、堿處理，0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡。
（2）裝柱：將層析柱固定于滴定架上，柱底墊一圓形尼龍紗，出口接一細(xì)塑料管并關(guān)閉出水。將浸泡于0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl中的DE52沿玻璃棒倒入柱中，待DE52自然沉降3～5cm高時(shí)，吸除0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl，或松開出水口螺旋夾，控制流速1～2ml/min，同時(shí)連續(xù)加入DE52至所需高度。待DE52完全沉降后，柱面放一圓形濾紙片。
（3）平衡：松開出水口螺旋夾，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡，控制流速為15滴/min，待流出液與洗脫液之pH值達(dá)到一致時(shí)，停止平衡。
（4）待提取樣品的準(zhǔn)備：將蛋白裝入透析袋里，置4℃冰箱，對(duì)0.01mol/L pH8.6 Tris-Cl透析。
（5）加樣、洗脫與收集：用吸管吸去柱面液體，以毛細(xì)吸管沿柱壁加入樣品，樣品體積相當(dāng)于柱床體積的1%～2%，蛋白濃度為50～70mg。啟開出水口螺旋夾使樣品緩慢進(jìn)入柱床內(nèi)，并用少量洗脫液清洗柱壁；待液體進(jìn)入柱床后，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl洗脫，控制流速為14～16滴/min。分部收集器收集，紫外監(jiān)測(cè)，或人工收集，以紫外分光光度計(jì)分別測(cè)定每管280nm OD值，描繪洗脫液峰。
（6）濃縮：將洗脫液的280nm OD上峰段與下峰段各管分別合并，裝入透析袋，以PEG濃縮至所需體積。
Tris-PO4離子交換層析法
該法在上述方法的基礎(chǔ)上稍加改良，即通過(guò)梯度洗脫，可用于血清中IgG和IgM的提取。
應(yīng)用文獻(xiàn)
伊氏錐蟲抗獨(dú)特型抗體疫苗的研究 楊漢春《中國(guó)獸醫(yī)雜志》 , 1995 (2) :3-5
用DE-52纖維素柱層析純化柔嫩艾美耳球蟲**代裂殖子 王建民《黑龍江畜牧獸醫(yī)》 , 2013 (14) :88-89
人工栽培靈芝中多糖的部分理化性質(zhì)及**調(diào)節(jié)作用 熊川《微生物學(xué)通報(bào)》 , 2018 , 45 (4) :825-835
DEAE-52纖維素靜態(tài)法分離純化樺褐孔菌多糖的工藝優(yōu)化 董文霞 《食品工業(yè)科技》 , 2018 (4)
發(fā)酵蘋果渣多糖分離純化、結(jié)構(gòu)及其與加工特性的關(guān)系 陜西師范大學(xué) 賈豐 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017 10期50卷
九華山黃精多糖的分離純化及化學(xué)表征 張庭廷 安徽師范大學(xué) 食品科學(xué) 2011年10期32卷
正交試驗(yàn)優(yōu)選枸杞多糖的超聲波降解工藝 李越鯤 寧夏農(nóng)林科學(xué)院國(guó)家枸杞工程技術(shù)研究中心 （DEAE-52纖維素 MSM2008上海摩速產(chǎn)膜分離裝置 ）中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志 2013 V19 ****7
DEAE-52纖維素靜態(tài)法分離純化樺褐孔菌多糖的工藝優(yōu)化 《食品工業(yè)科技》2018年第04期 作者：董文霞
南瓜多糖復(fù)合酶法提取及純化的研究 王洪偉 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué) 2007年8期28卷
