聚酰胺一定要預(yù)處理，起碼要 用乙醇泡過，柱子底下要墊脫脂棉，能快一些
我的聚酰胺流速超快！估計一個是粒度的問題，二是你的樣品問題。我先放了石頭在*底層，再放脫脂棉，再裝聚酰胺，流速非?？?。
產(chǎn)品介紹：
質(zhì)量指標(biāo)：分子量：14000～17000比表面：5～10m2/g
PH值: 6~7
產(chǎn)品價格：30~60目 180元/KG60～100目 240元/KG100目以上 300元/KG
溶解度：溶于濃鹽酸，甲酸，微溶于醋酸，苯酚等溶劑，不溶于水，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿和苯等常用有機溶劑，對堿較穩(wěn)定，對酸的穩(wěn)定性較差，尤其是無機酸，在溫度高時更敏感。
吸附原理：
聚酰胺是由酰胺鍵聚合形成的高分子化合物。其酰胺基可與羥基酚類，酸類，醌類，硝基等化合物以氫鍵形成結(jié)合而被吸附，其脂肪長鏈可作為分配層析的載體。聚酰胺在含水系統(tǒng)中層析時，聚酰胺作為非極性固定相，其層析行為反向柱層析；在非水溶劑系統(tǒng)時，聚酰胺作為分配層析的載體，其層析行為為正向柱層析。
應(yīng)用范圍：
聚酰胺特別適應(yīng)于多元酚類化合物的分離，如黃酮、醌類、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。
例如：葛根素中提取葛根黃酮、茶葉提取茶多酚、 人參中提取人參皂苷、銀杏葉中提取銀杏黃酮、甘草中提取甘草皂苷、甜葉菊中提取甜菊苷、發(fā)酵液中提取維生素和***等成份
對鞣質(zhì)吸附強，用于將植物粗提物中的鞣質(zhì)除去。
前處理：
新買的聚酰胺
取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不斷攪拌，除去氣泡后裝入柱中。用3-4倍體積的90-95%乙醇洗脫，洗至洗脫液透明并在蒸干后無殘渣（或極少殘渣）。再依次用2-2.5倍體積5%NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2-2.5倍體積的10%醋酸水溶液洗脫，*后用蒸餾水洗脫至pH中性，備用。
用過的聚酰胺
一般用5%NaOH水溶液洗脫，洗至NaOH水溶液顏色極淡為止。有時因某些鞣質(zhì)與聚酰胺又不可逆吸附，用NaOH水溶液很難洗脫，可用5%NaOH在柱中浸泡，每天將柱中的NaOH水溶液放出一次，并加入新的5%NaOH水溶液，這樣浸泡一周后，鞣質(zhì)可基本洗脫完。然后用蒸餾水洗脫至pH8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脫，*后蒸餾水洗脫至pH中性，重復(fù)使用。
聚酰胺吸附法的操作：
1、裝柱：一般將顆粒狀聚酰胺混懸于水中，使其充分膨脹，然后裝柱，讓聚酰胺自由沉降；當(dāng)用非極性溶劑系統(tǒng)時候，則用組分中低級性的溶劑裝柱。
2、稀釋適當(dāng)濃度上樣：一般每100ml聚酰胺上樣1.5-2.5g，樣品先用洗脫溶劑溶解，濃度為20%-30%。水溶性化合物直接上樣；若提取物水溶性不好，則用揮發(fā)性有機溶媒溶解、拌適量聚酰胺、揮干或減壓蒸干、干法裝入柱頂。
3、水洗：先用水洗脫。
4、醇洗：在水中遞增乙醇濃度至濃乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，遞增甲醇至純甲醇洗脫。若仍有物質(zhì)未被洗脫，可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脫，分段收集。
5、找到*佳吸附比：先小量試驗找到*佳吸附比。
6、放大：根據(jù)小試及*佳吸附比進(jìn)行放大試驗。
7、聚酰胺的回收：使用過的聚酰胺一般用5%氫氧化鈉溶液洗滌，然后水洗，再用10%醋酸液洗，然后用蒸餾水洗至中性，即可。

對于分離黃酮類化合物來說，聚酰胺是較理想的吸附劑。其吸附強度主要取決于黃酮類化合物分子中的羥基數(shù)目與位置。一般有以下規(guī)律：
1、苷元相同，連接糖越多，吸附力越大，流出越慢。
2、母核上增加羥基，洗脫速度相應(yīng)減緩。
3、對位、間位酚羥基使吸附能力 〉鄰位酚羥基。
4、不同類型的黃酮的流出順序一般是：異黃酮 〉二氫黃酮醇〉黃酮 〉黃酮醇。
5、分子中芳香核、共軛雙鍵多者則吸附力強，晚出柱。
6、若形成分子內(nèi)氫鍵則吸附力減弱。

含水系統(tǒng)洗脫能力：堿液>甲醇>水
溶劑洗脫能力與溶劑極性相關(guān)可使化合物得到較好的分離。
選擇系統(tǒng)時，可以將樣品加入上述溶劑系統(tǒng)中，觀察樣品在聚酰胺薄膜的層析行為，然后確定溶劑系統(tǒng)。
聚酰胺與大孔樹脂的區(qū)別：
吸附原理不同：大孔樹脂是物理吸附原理；聚酰胺是化學(xué)吸附原理，氫鍵吸附，用于酚類、黃酮類、醌類成分的分離。
大孔樹脂的分離效果沒有聚酰胺好。若是粗粉可以用大孔樹脂進(jìn)行分段，聚酰胺可用于黃酮類成分的細(xì)分或純化。
聚酰胺樹脂可以使用其干柱層析功能，在分離黃酮的過程中作用也是很大的，而大孔樹脂則沒有此功能。
聚酰胺樹脂可以首先用聚酰胺薄膜展開系統(tǒng)，而大孔樹脂沒有薄層
樹脂進(jìn)行新藥研發(fā)，其新藥若用大孔樹脂制備，必須有打孔的殘留檢查，而聚酰胺目前還沒有正式的文件要檢查其殘留
聚酰胺上樣時，其樣品中的鞣質(zhì)會對主子產(chǎn)生死吸附，大孔出現(xiàn)這種現(xiàn)象很少
大孔的可選擇類型比聚酰胺多，而且還增加了許多鍵合類型，如ASD型，其鍵合了酰胺鍵，增加了其選擇性。
聚酰胺的不足及解決方案：
聚酰胺柱層析的不足：
比如機械強度不大，
粒度不均勻，分離時流速較慢
一些小分子雜質(zhì)混入的問題
采用的解決方案有：
1.裝柱前先過篩
2.裝柱時用5%甲醇或10%鹽酸預(yù)先除去小分子雜質(zhì)
3.與硅藻土混合制粒以增加機械強度。