不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究（MSM2013實驗用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究（MSM2013實驗用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究（MSM2013實驗用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究（MSM2013實驗用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究（MSM2013實驗用膜分離裝置）

不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究

尹利端1，王桐1，宋文山2，劉楚怡2，3，*，仲米存1，杜芬2，李八方2，3

（1.煙臺新時代健康產(chǎn)業(yè)有限公司，山東煙臺264006；2.青島海洋生物醫(yī)藥研究院，山東青島266001；3.中國海洋大學，山東青島266073）

摘 要：通過動物實驗對不同分子量松花肽的增強**力活性進行研究。從松花粉粕中制備平均分子量在1 kDa～3 kDa和小于1 kDa范圍的兩種松花肽，分析其氨基酸組成，進而研究兩種分子量松花肽在增強細胞**、體液**和單核-巨噬細胞**功能上的活性。研究發(fā)現(xiàn)，兩種分子量的松花肽，都具有顯著增強細胞**功能、增強體液**功能和增強單核-巨噬細胞功能的作用。綜上所述，小于1kDa松花肽和1kDa～3kDa松花肽，都具有增強**力的功能。

關(guān)鍵詞：松花粉；松花肽；分子量；增強**力；動物實驗

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2019.03.011

作者簡介：尹利端（1979—），男（漢），工程師，碩士，研究方向：功能食品的研究、開發(fā)與產(chǎn)業(yè)化。

*通信作者：劉楚怡（1986—），女（漢），博士，研究方向：新資源食品及其功能性研究與開發(fā)。

Study on Immune Function Enhancing of Mouse with Different Molecular Weights of Peptides from Pine Pollen

YIN Li-duan1，WANG Tong1，SONG Wen-shan2，LIU Chu-yi2，3，*，ZHONG Mi-cun1，DU Fen2，LI Ba-fang2，3
（1.Yantai New Era Health Industry Chemical Co.，Ltd.，Yantai 264006，Shandong，China；2.Marine Biomedical Research Institute of Qingdao，Qingdao 266001，Shandong，China；3.Ocean University of China，Qingdao 266073，Shandong，China）

Abstract：Animal experiments were conducted to study the enhanced immunity activities of different molecular weight peptides from pine pollen.Two kinds of pine pollen peptides with an average molecular weight of 1 kDa-3 kDa and less than 1 kDa were prepared from pine pollen residues.The amino acid composition was analyzed，and the cellular immunity，humoral immunity，and mononuclear-macrophage immune functional activity of pine pollen peptides were studied.The studies had found that two molecular weights of pine pollen peptides had a significant role in enhancing cellular immunity，enhancing humoral immunity，and enhancing mononuclear macrophage function.In summary，both of the peptides had the function of enhancing immunity.

Key words：pine pollen；pine pollen peptide；molecular weight；enhancement of immune function；animal experimenty

引文格式：

尹利端，王桐，宋文山，等.不同分子量松花肽增強小鼠**力的功能研究[J].食品研究與開發(fā)，2019，40（3）：61-65

YIN Liduan，WANG Tong，SONG Wenshan，et al.Study on Immune Function Enhancing of Mouse with Different Molecular Weights of Peptides from Pine Pollen[J].Food Research and Development，2019，40（3）：61-65

松花粉是指經(jīng)人工采集得到的干燥松樹花粉，作為生命的遺傳物質(zhì)，含有豐富的蛋白質(zhì)、微量元素、黃酮及必需脂肪酸等營養(yǎng)成分[1]及生物活性物質(zhì)[2]，具有抗衰老、抗氧化、抗疲勞、促進生長發(fā)育、調(diào)整機體代謝等多種功效[3]。目前松花粉水提物的制備技術(shù)已相對成熟，并形成了國珍松花粉等一系列在售產(chǎn)品。但在松花粉水提物的制備過程中，卻產(chǎn)生了大量的松花粉粕殘渣，這些殘渣中還存在著大量上等的蛋白質(zhì)資源尚未得到充分利用。一般認為松花粉中蛋白質(zhì)勝于酪蛋白，且質(zhì)量高于牛肉、雞***白[4]。簡單的丟棄松花粉粕不僅會帶來環(huán)境的壓力，也造成了大量營養(yǎng)物質(zhì)的浪費。因此，**高效的從松花粉粕中制備具有生物活性的松花肽，成了亟待解決的問題。目前國內(nèi)關(guān)于從松花粉粕中制備活性松花肽的研究未見報道，利用松花粉粕開發(fā)具有生物活性的松花肽，具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。

生物活性肽就是指一類相對分子質(zhì)量小于6 kDa，介于氨基酸與蛋白質(zhì)之間的分子聚合物[5]，具有增強機體防御功能、調(diào)節(jié)生命節(jié)律、預(yù)防**和促進康復(fù)等多種生物學功能的多肽[6]。具有增強**功能的活性肽稱作**活性肽[7]。近年來，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些天然**活性膚如胸腺膚等，可誘導(dǎo)**細胞分化、增殖與成熟，增強巨噬細胞的吞噬能力[8]，提高機體對外界病原物質(zhì)的抵抗能力，提高**低下小鼠的**活性[9]。部分**活性肽已經(jīng)作為一種**因子應(yīng)用于醫(yī)學臨床抗感染、**缺乏癥的**上，并且起到了良好的**效果[10]。

本研究從松花粉粕中制備1 kDa～3 kDa和小于1 kDa兩種分子量的松花肽，并按照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003版）[11]要求，對兩種平均分子量松花肽的增強**力功能進行了研究。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

松花粉粕：山東煙臺新時代健康產(chǎn)業(yè)有限公司；胰蛋白酶（10 000 U/g）：南寧龐博生物工程有限公司；無水乙醇（分析純）、氫氧化鈉（分析純）、三***（分析純）、三氟乙酸（分析純）、硫化鈉（分析純）、乙腈（色譜純）：北京化學試劑公司；3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴鹽 [3-（4，5-dimethyl-2-thiazolyl）-2，5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT]、牛血清蛋白、維生素B12、谷胱甘肽及膠原蛋白：Sigma公司；Giemsa液：索萊寶公司。

Agilent 1260高效液相色譜儀、Agilent 1100型氨基酸自動分析儀：美國安捷倫公司；MSM2013實驗室用膜分離設(shè)備：上海摩速科學器材有限公司；UV-2010PC紫外可見分光光度計：尤尼克（上海）儀器有限公司；Versamax Tunable Microplate Reade光柵式恒溫酶標儀：Versamax Tunable公司；BX43熒光顯微鏡：Olympus公司。

SPF級昆明小鼠：山東朋悅實驗動物繁育有限公司。